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總蛋白試劑試盒說明書
                                   雙縮脲法
一、測定原理:
蛋白質(zhì)多肽鏈中的肽鍵(-CONH)在堿性條件下,與銅離子絡(luò)合形成紫紅色化合物,在540nm處有最大吸收,所產(chǎn)生的絡(luò)合物顏色與蛋白質(zhì)的濃度成正比。通過與同樣處理的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品相比較,可求出血清總蛋白的濃度。
 
二、試劑組成與配制:
1.測定試劑50mlX4瓶, 4℃避光保存。
主要成分:硫酸銅6.0mmol/L,氫氧化鈉600mmol/L,碘化鉀30mmol/L,酒石酸鉀鈉32mmol/L。
2. 校準(zhǔn)液(68g/L)規(guī)格:1ml ,4℃避光保存。
 
三、樣本要求
一、血清或血漿樣本均應(yīng)不溶血,在2-8℃下可保存8天。
二、操作步驟:
1、試劑配制:本試劑為液體,可直接使用
2.實(shí)驗(yàn)條件:
 
溫度      37℃       試劑用量    1000ul
       波長      540nm       樣本用量    20ul
     反應(yīng)時(shí)間    600秒       測定模式    終點(diǎn)法
注意:本試劑具有腐蝕性,請勿用口吸吸管。如果濺出,應(yīng)立即用大量流水沖洗被污染部位。
3.校準(zhǔn)及質(zhì)量控制程序:
手工操作:按下表加入試劑、校準(zhǔn)品及樣本.
 
  空白管 校準(zhǔn)管 質(zhì)控管 樣本管
TP試劑 (ul) 1000 1000 1000 1000
37℃孵育10分鐘        
蒸餾水  (ul) 20      
校準(zhǔn)品  (ul)   20    
質(zhì)控品  (ul)     20  
樣本    (ul)       20
混勻,37℃下孵育10分鐘,波長540nm,空白管調(diào)零,讀取校準(zhǔn)管及樣品管的吸光度(A)值
 
4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果的計(jì)算方法:

參考值:65-80g/L
   引用的參考值范圍代表本法的期望值,僅供參考,建議各實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證這一參考范圍或建立自己的參考值范圍。
 
四、注意事項(xiàng):
1、血紅蛋白≤2g/L、膽紅素≤342umol/L和維生素C≤0.4g/L、甘油三酯≤5.0mmol/L均不影響效果。
2、當(dāng)檢驗(yàn)結(jié)果≥150g/L時(shí),請用生理鹽水稀釋后在測定,結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。
3、試劑中含有防腐劑和穩(wěn)定劑,可能存在一定的刺激作用和毒性,請勿直接接觸皮膚、眼睛。一旦接觸,立即用大量清水沖洗。請勿吞服。
4、試劑與樣本的用量可按比例進(jìn)行改變。